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      SuperCultureTM 小鼠淋巴細胞培養基

      發布時間:2016.11.07

                                                               

           

       SuperCultureTM  小鼠淋巴細胞培養基(Serum-Free Medium for Lymphocyte)適用于小鼠淋巴細胞、DC 細胞的體外培養。本產品是一款化學成分限定的培養基,該培養基中的所有成分均使用細胞培養級別的原料生產,不含血清,有效避免血清質量變動及血清組分、外源成分對實驗研究的影響,可實現小鼠淋巴細胞、DC 細胞等免疫細胞的體外培養。


      使用方法:

      例1:小鼠T淋巴細胞培養

      1、 培養器皿的預包被:取 5μg/ml 小鼠 CD3 單抗包被培養器皿,4℃過夜或 37℃孵育 2 小時。使用前移除剩余包被液。

      2、 將 SuperCultureTM  小鼠淋巴細胞培養基放置室溫平衡。

      3、 無菌分離小鼠外周血淋巴細胞或脾臟淋巴細胞(建議使用達優小鼠淋巴細胞分離

      液:DKW33-R0100)。

      4、 根據計數結果,用SuperCultureTM  小鼠淋巴細胞培養基將分離獲得的淋巴細胞按2-2.5×106 個/ml 的濃度接種于已包被小鼠 CD3 單抗的細胞培養器皿中,加入 5μg/ml 的小鼠 CD28 單抗、300U/ml 的 rmIL-2,刺激 T 淋巴細胞的生長和增殖,37℃,5% CO2、飽和濕度的培養箱中培養。

      5、 觀察細胞活化狀態,每 2-3  天取樣計數細胞濃度并根據計數結果補充新鮮

      SuperCultureTM  小鼠淋巴細胞培養基(含 300U/ml 的 rmIL-2),調整細胞濃度為 1.5×106個/ml。

      6、 收獲細胞供后續檢測或實驗使用。

       

      2:小鼠骨髓DC細胞培養

      1、 將 SuperCultureTM  小鼠淋巴細胞培養基放置室溫平衡。

      2、 無菌分離小鼠骨髓單核細胞。根據計數結果,用 SuperCultureTM  小鼠淋巴細胞

      培養基將分離獲得的單核細胞按 1-5×106 個/ml 的濃度接種于 6 孔板或 12 孔板中,每孔加入終濃度 200U/ml 的 rmGM-CSF 和 rmIL-4,37℃,5% CO2、飽和濕度的培養箱培養。

      3、 48 小時后,輕輕晃動培養板,吸棄全部培養基及懸浮細胞,加含 200U/ml 的 rmGM-CSF 和 rmIL-4 的新鮮培養基繼續培養。

      4、 隔日半量換液,即收集舊培養液,離心后用含 200U/ml 的 rmGM-CSF 和 rmIL-4

      的新鮮培養基重懸細胞沉淀,然后再將細胞懸液放回原皿。

      5、 第 6 天半量換液后加細胞因子 TNF-α 1000U/ml 或其他促成熟的細胞因子,繼

      續培養兩天,以促進樹突狀細胞成熟(可在 TNF-α 加入前 1 天加入抗原,以獲得抗原負載的 DC)。

      6、 收集懸浮和輕微貼壁的細胞,即為成熟的 DC。


      保存方法:

      2~8℃,避光保存,保持無菌,保質期 12 個月。

      注意:

       

      本品避免反復凍融,使用時注意無菌操作。

      本品培養T淋巴細胞時,加入2-5%的細胞培養添加物可增強細胞擴增效率。



      貨號

             名稱

      規格







      SuperCultureTM 小鼠淋巴細胞培養基



      DKW34-MCL1


      250ml



      Serum-Free Medium for Mouse Lymphocyte









      本品僅供研究使用。


      400-630-4366
       
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